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聯(lián)系我們動物組織總蛋白提取
點擊次數(shù)：698 更新時間：2021-12-22
變性總蛋白提取（SD-001）
以下步驟是從 15-20 mg 組織中提取，對于昆蟲組織，例如果蠅，使用 15-20 個幼蟲，蛹或成蟲樣本。如果起始量較大或者較小，需調(diào)整相應裂解液的用量比例。
1. 將離心管柱及接收管套管放在冰上預冷
2. 將 15-20 mg 組織放置于離心管柱上，用塑料棍扭轉研磨 50-60 次，加入 200ul 細胞裂解液，繼續(xù)研磨 30-60 次。(組織用量不要過量，無需過度研磨，裂解液可分兩次加入以得到最佳效果)注意：塑料研磨棒可以重復使用，用蒸餾水*沖洗干凈，用紙巾擦干。
3. 蓋上蓋子室溫孵育 1-2 分鐘，14000-16000rpm 離心 1-2 分鐘取出。
4. 立刻將收集管放置于冰上，棄去離心管柱，蛋白提取完成可應用于下游實驗。
請注意：部分未*裂解的組織不會影響樣品質量。
天然總蛋白提取（SN-002）
1. 將天然細胞裂解液(SN-002)，離心管柱及接收管套管放在冰上預冷。
2. 將 15-20 mg 組織放置于離心管柱上，用塑料棍扭轉研磨 50-60 次，加入 200ul 天然細胞裂解液(SN-002)，繼續(xù)研磨 30-60 次。(組織用量不要過量，無需過度研磨，裂解液可分兩次加入以得到最佳效果)。注意：塑料研磨棒可以重復使用，用蒸餾水*沖洗干凈，用紙巾擦干。
3. 開蓋冰上孵育 5 分鐘，蓋上蓋子，4℃，14000-16000rpm 離心 1-2 分鐘取出。
4. 立刻將收集管放置于冰上，棄去離心管柱，蛋白提取完成可應用于下游實驗。
