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豬ELISA試劑盒的靈敏度怎樣判斷?
點擊次數(shù):1 更新時間:2025-11-06

ELISA試劑盒的靈敏度可通過關(guān)鍵驗證實驗(回收試驗、精密度測試等)和核心判定指標(biāo)(線性范圍、檢測下限等)綜合判斷,同時需結(jié)合試劑盒說明書與樣本特性。

一、關(guān)鍵驗證實驗

通過實驗驗證試劑盒檢測低濃度樣本的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性:

回收試驗:向樣本添加已知濃度目標(biāo)物,回收率需在80%-120%,偏離提示基質(zhì)干擾(如血清成分抑制結(jié)合)。

二、精密度測試

板內(nèi)精密度:同板內(nèi)重復(fù)檢測低濃度樣本,變異系數(shù)(CV)≤5%

板間精密度:不同批次試劑盒檢測同一樣本,CV10%,精密度差會導(dǎo)致低濃度結(jié)果波動[[1]]

特異性交叉驗證:檢測結(jié)構(gòu)類似物(如家族蛋白),交叉反應(yīng)率需5%,避免假陽性干擾靈敏度判斷

三、核心判定指標(biāo)

指標(biāo)

定義

驗證方法

線性范圍

能準(zhǔn)確定量的濃度區(qū)間。

梯度稀釋樣本,實測濃度與理論值偏差需在80%-120%

檢測下限(LOD

可穩(wěn)定檢出目標(biāo)物的zui低濃度,通常為空白樣本標(biāo)準(zhǔn)差的3倍對應(yīng)濃度。

通過空白樣本多次檢測計算標(biāo)準(zhǔn)差,推導(dǎo)zui低可檢出濃度。

定值血清測定

用低、中、高濃度定值血清測定,測得值需符合靶值范圍(±2S)。

對比實測值與定值血清靶值,判斷是否在合格區(qū)間。

四、結(jié)論與注意事項

優(yōu)先參考說明書:靈敏度數(shù)值通常在說明書中明確標(biāo)注,不同試劑盒可能采用不同判定方法。

樣本特性適配:若樣本中目標(biāo)物濃度極低(如納克級),需選擇LOD更低的試劑盒(如<0.1μmol/L)。

綜合驗證:單一指標(biāo)不能wanquan反映靈敏度,需結(jié)合回收試驗、精密度及線性范圍結(jié)果綜合評估。

聯(lián)系人:王經(jīng)理
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