| 產品名稱:鼠抗人D-泛酸(Pantothenic Acid)單抗品牌英文名稱:Mouse anti-human D-Pantothenic Acid mAb
 規(guī)格:96T/48T
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 以下是人elisa試劑盒的訂購信息: | 產品名稱 | 鼠抗人D-泛酸(Pantothenic Acid)單抗品牌 |  | 英文名稱 | Mouse anti-human D-Pantothenic Acid mAb |  | 規(guī)格 | 96T/48T | 
 鼠抗人D-泛酸(Pantothenic Acid)單抗品牌操作流程示意:
 
  ? 鼠抗人D-泛酸(Pantothenic Acid)單抗品牌操作步驟:
 1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
 2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
 3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
 4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
 5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復 5 次,拍干。
 6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
 7.溫育:操作同 3。
 8.洗滌:操作同 5。
 9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
 10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
 11.測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內進行。
 鼠抗人D-泛酸(Pantothenic Acid)單抗品牌試劑配制1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
 2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
 3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
 4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
 5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
 6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
 7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
 8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
 9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
 10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
 鼠抗人D-泛酸(Pantothenic Acid)單抗品牌注意事項:
 1.加樣:
 ①實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
 ②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
 ③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經常校正其準確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
 2.溫育:
 ①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應時間的條件;
 ②用1個小溫度計放置在板孔反應液中測量觀察;
 ③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學梯度會造成“邊緣效應”,因此盡量采用水浴;
 3.洗板:
 ①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復合物脫離;
 ②洗板機洗板時應經常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
 ③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結合的方法,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,或適當增加洗板的次數;
 4.顯色:
 ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應條件為37℃或室溫反應15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應盡量避免接觸金屬器械。
 5.判定:
 讀取結果要在15-30 min內完成,定性測定用肉眼判讀試驗結果時,反應板應水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標儀讀取結果,酶標儀不應置于陽光或強光照射下,需先預熱15-30 min再進行測試。
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