| 以下是人elisa試劑盒的訂購信息: | 產(chǎn)品名稱 | 大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)elisa檢測試劑盒費用 |  | 英文名稱 | Rat Bone morphogenetic protein 2,BMP-2 ELISA Kit |  | 規(guī)格 | 96T/48T | 
 產(chǎn)品名稱:大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)elisa檢測試劑盒費用英文名稱:Rat Bone morphogenetic protein 2,BMP-2 ELISA Kit
 規(guī)格:96T/48T
 保存溫度:2-8℃低溫保存
 運輸方面:現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時間到貨
 大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)elisa檢測試劑盒費用操作流程示意:
 
  ? 大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)elisa檢測試劑盒費用試劑配制
 1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
 2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
 3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
 4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
 5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
 6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
 7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
 8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
 9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
 10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
 大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)elisa檢測試劑盒費用注意事項:
 1.加樣:
 ①實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
 ②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
 ③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
 2.溫育:
 ①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件;
 ②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察;
 ③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水浴;
 3.洗板:
 ①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
 ②洗板機洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
 ③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù);
 4.顯色:
 ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
 5.判定:
 讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時,反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測試。
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 2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
 3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
 4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
 5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
 6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
 7.溫育:操作同 3。
 8.洗滌:操作同 5。
 9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
 10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
 11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
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